Антимикробные свойства фенольно гидрофобных препаратов прополиса

Применение препаратов прополиса при лечении различных заболеваний (органов зрения, слуха, желудочно-кишечного тра­кта, туберкулеза, ожогов и др.) требует глубоких знаний свойств этого вещества.

С конца 40-х – начала 50-х годов ведутся работы по изучению антимикробных свойств фенольно гидрофобного препарата прополиса.

Большое количество работ было посвящено изучению бактериостатических и бактерицидных свойств препаратов прополиса.

Проводились исследования антимикробного действия прополиса-сырца, водного, спиртового, ацетонового и бензинового извлечений прополиса, прополиса, очищенного от воска, с пасек различных местностей, собранного на одной пасеке, но в разное время медосбора и из разных ульев, с различными сроками хранения, продукта сухой перегонки прополиса, прополисированных питательных сред и прополисовых мазей. Изучалась адаптация бактерий к препаратам прополиса.

Свойства антимикробной активности препаратов прополиса исследовались на 72 штаммах, принадлежащих к 23 видам микробов. После внесения кусочка прополиса в количестве 0,05, 0,1, 0,2 и 0,3 г в пробирки с 5 мл стерильного мясо-пептонного бульона и выдерживания их в термостате при температуре 37°С в течение 7 дней, рост микробов прекращался за исключением пробирок с 0,05 г прополиса. В них иногда наблюдался рост небольших грамотрицательных, неподвижных, с закругленными концами палочек. При длительном термостатировании мясо-пептон­ного бульона с прополисом в отдельных пробирках появлялась плесень. Пробирки же с 0,2 и 0,3 г препарата прополиса оставались стерильными. Кроме того, при посеве определенных видов бактерий в мясо-пептонный бульон с кусочками прополиса, развития этих микроорганизмов не отмечалось. Это указывает на бактериостатические свойства фенольно гидрофобного препарата прополиса.

Изучая условия образования, сбора и хранения прополиса, естественно, можно сделать заключение, что он постоянно загрязняется микрофлорой из окружающей среды. Тем не менее этого не наблюдается. Так, при внесении в питательные среды смыва прополиса в физиологическом растворе роста колоний бактерий не происходит или же развиваются только отдельные, более устойчивые виды.

Отсутствие роста микробов характеризует бактерицидное действие препаратов прополиса. Эти данные подтверждены результатами исследования суточных бульонных культур в динамике (табл. 1).

С помощью метода тест-объектов установлено, что более выраженное бактерицидное влияние оказывают ацетоновые и спиртовые вытяжки прополиса, в этих растворах через сутки погибают даже споры, в отличие от бензинового, водного экстрактов и самих растворителей, не вызывающих такого эффекта.

При исследовании прополисированных сред (В.П.Ки­валкина, 1964) наиболее высокой чувствительностью обладали грамположительные микроорганизмы, особенно спорообразующие, и низкой – грамотрицательные (таб­лица 2).

 

Таблица 1
Бактерицидное действие нативного прополиса
Название Время прекращения роста бактерий
бактерий минуты часы
  10 20 30 1 2 4 8 42
Str. haemolyticus + + + +–
Staph. aureus + + + +
Staph. albus + + + +–
Staph. citreus + + + + +
Bact. rhusiopathiae suis + + +–
List. monocyto­genes + + + + +–
Past. avium u cuniculi + +–
Bact. coli + + + + +
Sal. enterit.
Gartneri
+ + + + +
Sal. abortus equi + + + + +
Sal. typhi abdom + + + + +–
Bact. prodigiosum + + + + +
Bact. pyocyaneum + + + + +
Proteus vulgaris + + + + +
Bac. anthracoides + + + + + + + +
Bac. pseudo­anthracis + + + + + + + +

Примечание: “+” – рост,
“–” – нет роста,
“+–” – роста нет или он замедленный.

Таблица 2
Антимикробная активность фенольно гидрофобного препарата прополиса
Название микробов Количество прополиса,
экстрагированное в 100 мл среды, задерживающее рост микробов, г
Грамположительные
Bact. rhusiopathiae suis 0,1
Str. haemolyticus 0,1–,25
Str. apis 0,2–0,5
Staph. aureus 0,1–0,25
Staph. albus 0,1–0,25
Staph. citreus 0,1–0,25
List. monocytogenes 0,5–1,0
Bac. subtilis 0,1–0,2
Bac. anthracoides 0,05 и меньше
Bac. pseudoanthracis 0,05 и меньше
Bac. anthracis 0,025
Bac. mycoides 0,05
Bac. alvei 0,25
Mycobact. tuberculosis 0,5
Грамотрицательные
Past. avium u cuniculi 0,025
Bact. coli 5,0 и больше
Sal. enterit, gartneri 2,5–5,0
Sal. cholerae suis 5,0 и больше
Sal. typhi murium 5,0 и больше
Bact. pradigiosum 5,0
Bact. pyocyaneum 5,0
Proteus vulgaris 5,0
Bact. necrophorum 0,05–0,1

 

 

Различная чувствительность грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов указывает на избирательное действие веществ, экстрагируемых из препаратов прополиса в питательные среды. Отмечена также термостабильность антимикробных веществ пчелиного клея.

Сравнительное изучение бактерицидных свойств прополиса-сырца, его смо­лобальзамической части и воска, отделенного от прополиса, показало, что высокое содержание восковых продуктов снижает его антимикробные свойства.

Поскольку основным сырьем для изготовления прополиса служат нативные вещества растительного происхождения (С.А.Поправко, 1972; Ж.Чижмарик, И.Мател, 1972, и др.), которые у разных видов растений, а также у аналогичных, но произрастающих не в одних и тех же экологических условиях, неодинаковы в качественном и количественном отношениях, ученые предполагали, что образцы прополиса, собранные в различных районах должны отличаться между собой как по составу действующих начал, так и по характеру биологической активности. В связи с этим было изучено антимикробное действие образцов пчелиного клея из различных географических зон. Прополис этих местностей отличался  по  степени  активности,  но  большинство исследованных образцов были близкими по характеру действия (В.П.Кивалки­на, 1964). Отмеченные различия в терапевтическом действии этих образцов можно объяснить неодинаковым процентным содержанием в них восков и механических примесей.

Прополис, собранный на одной пасеке, но из отдельных ульев и в разное время года – мае, июне, июле, сентябре – обладал одинаковыми антимикробными свойствами, но у майских и июньских образцов они были более выраженными, чем у видов, собранных в другие месяцы.

Сроки сохранения активности препарата прополиса также играют немаловажную роль. Многочисленные литературные данные (Л.А.Андреева, 1967; А.И.Артемьев, 1969; А.И.Тенцова, И.С.Ажгихин, 1974) свидетельствовали о том, что многие лекарственные препараты довольно эффективного терапевтического действия в зависимости от условий хранения утрачивают полностью или частично свою активность. В.П.Кивалкина (1964) исследовала пчелиный клей, собранный в одно и то же время, но в разные годы (в течение десяти лет), и установила, что при соответствующих условиях антимикробная способность его сохраняется довольно продолжительный период. Для прополиса определенной местности характерна определенная антимикробная активность.

Эффективность антибактериального средства может быть связана не только с его влиянием на микроба-возбу­дителя, но и с изменением иммунологической реактивности микроорганизма, в частности фагоцитоза. Действие фенольно-гидрофобного препарата прополиса на фагоцитоз в эксперименте изучено В.А.Ба­лалыкиным (1969) и др. Авторы сообщают об активизации фагоцитарной реакции под воздействием препарата прополиса, но не приводят данных о клеточном составе перитонеального экссудата и степени завершенности фагоцитоза. Эти вопросы разрешены В.Ф.Оркиным (1971). В экспериментах на животных он обнаружил, что фенольно гидрофобный препарат прополиса стимулировал реакции фагоцитоза. Кровь и перитонеальный экссудат контрольных животных в отличие от опытных содержали большое количество (прогрессивно возрастающее) микробов. Через 6 ч после введения препарата прополиса в крови опытных мышей стафилококки не обнаруживались, в перитонеальном экссудате появлялись отдельные бактериальные клетки, а в то же время все поле зрения было покрыто лейкоцитами. У животных, которым вводили фенольно гидрофобный препарат  прополиса, не менее, чем в 2 раза повышалось фагоцитарное число, изменялся клеточный состав экссудата. В первые 1,5-3 ч в фагоцитозе участвовали, главным образом, макрофаги, в то время как в экссудате контрольных животных доминировали лимфоциты. Участие макрофагов в фагоцитозе расценивается многими исследователями, как пробуждение защитных сил организма. Существенным является ускоренное внутриклеточное переваривание ста­филококков под влиянием препарата прополиса, активация степени завершенности фагоцитоза.

Полученные результаты, как указывают авторы, свидетельствуют о терапевтической активности фенольно гидрофобного препарата прополиса в организме. С одной стороны, после кратковременного воздействия прополиса бактерии перестают размножаться в организме, с другой – защитные силы организма под влиянием пчелиного клея активизируются, что выражается в активном фагоцитозе стафилококков.

Следовательно, механизм лечебного действия препарата прополиса основан не только на его антибактериальном свойстве и детоксирующем эффекте, но и на влиянии на защитные реакции организма. Причем, в отличие от антибиотиков, фенольно гидрофобный препарат прополиса не только не угнетает общую иммунологическую реактивность макроорганизма, но даже превышает ее. Результаты проведенных исследований, на наш взгляд показывают высокую активность фенольно гидрофобного  препарата прополиса при экспериментальной стафилококковой инфекции, что представляет интерес для клинической практики.

Целесообразность всестороннего изучения прополиса в данном направлении была подтверждена и работами А.И.Балалыкиной (1972), изучавшей влияние фенольно гидрофобного препарата прополиса на специфические и неспецифические факторы иммунитета при совместном введении его с некорпускулярным сальмонеллезным антигеном, а также на плазмоцитарную реакцию в лимфоидных органах при иммунизации некорпускулярным и корпускулярным сальмонеллезными антигенами.

Для оценки результатов экспериментов авторы использовали тесты: реакцию агглютинации в преципитации, определение содержания белка и белковых фракций сыворотки крови, плазмоцитарную реакцию в лимфоидных органах. С целью иммунизации животных применяли глюцидо-липопротеиновый комплекс (полный антиген), извлеченный из культуры S. enteritidis (var. Dublin, 1204) по методу Буавена, и корпускулярный антиген, приготовленный из культуры гомологичного штамма.

Исследователи установили, что содержание агглютининов и преципитинов в сыворотке крови кроликов и белых крыс, иммунизированных полным сальмонеллезным антигеном в сочетании с препаратом прополиса, значительно выше, чем у животных, привитых другими формами полного антигена, причем, уровень общего белка существенно не изменялся. Введение полного антигена совместно с прополисом вызывает стимуляцию синтеза гаммаглобулина. Кроме того, иммунизация белых крыс полным антигеном с прополисом, по сравнению с другими формами этого антигена, обуславливает более раннюю и интенсивную иммуно-морфологическую перестройку как в регионарных, так и в отдельных лимфатических узлах.

Введение кроликам некорпускулярного и корпускулярного сальмонеллезных антигенов в сочетании с препаратом прополиса усиливает плазмоцитарную реакцию в регионарных и в отдельных лимфатических узлах по сравнению с теми же антигенами, введенными без прополиса. При иммунизации полным антигеном отмечается быстрое и значительное увеличение количества клеток плазмоцитарного ядра, при действии же корпускулярного – эта реакция менее интенсивна и имеет большую протяженность во времени. Наряду с этим авторами обнаружено, что фенольно гидрофобный препарат прополиса, введенный в комплексе с сальмонеллезным полным антигеном, проявлял более выраженные адьювантные свойства в сравнении с другими препаратами (сапонин и т.д.), что указывает на возможность использования его в качестве стимулятора специфических и неспецифических факторов иммунитета.

Особенную ценность представляют сведения о бактерицидном действии препарата прополиса на туберкулезную палочку (Т.В.Виноградова, Г.П.Зайцева, 1966), хотя некоторые клинико-экспериментальные исследования (Л.А.Ли­повская, Д.Е.Авергун и др., 1972) дают умеренную оценку его эффективности в данном аспекте.

Долгое время считали, что поверхность туберкулезных микобактерий покрыта капсулой, пропитанной жировосковыми продуктами, которые не пропускают влагу, различные химические вещества, чем и обусловлена их устойчивость. Данные электронной микроскопии опровергли эту гипотезу; протоплазма туберкулезных бактерий оказалась покрыта сверху лишь тончайшей мембраной. В связи с этим кислотоустойчивость туберкулезных палочек стали объяснять не наличием капсулы, а составом протоплазмы самой клетки, которая богата липоидами, составляющими до 40% тела микробактерии. Они хорошо растут на специально приготовленных питательных средах. Если же к средам добавлять, например, фенольно гидрофобный препарат прополиса, то рост туберкулезных палочек задерживается. Роста у этих бактерий не наблюдается, если прополисовую вытяжку прибавить к туберкулезным микробам до посева их на питательные среды.

С учетом данного обстоятельства были изучены (Б.Л.Мазур, 1960) бактерицидные свойства трех эталонных штаммов микобактерий туберкулеза человеческого (штам­ма “ГО” и “К6”) и бычьего типа (штамм vallee) на синтетической минеральной среде, приготовленной по методике автора. Использовано два вида минеральных сред: концентрированная и просто минеральная. В опытные и контрольные (среды без прополиса) пробирки переносили по одной петле культуры туберкулезных микобактерий, и посевы инкубировали в термостате при температуре 38°С. В контрольных пробирках на 4-5 день отмечался обильный рост микроорганизмов, а в опытных пробирках за все время эксперимента (90 дней) размножения их не наблюдалось, что указывает на бактериостатическое влияние препарата прополиса на возбудителя туберкулеза.

 

Интересные данные о бактерицидном действии прополиса на возбудителя туберкулеза были получены И.М.Ра­биновичем (1960). Он провел следующие исследования. Мокроту людей, больных туберкулезом, наносили на предметные стекла, высушивали и обрабатывали серной кислотой, предметные стекла промывали дистиллированной водой и опускали в питательную среду для размножения туберкулезных бактерий. В качестве питательной среды использовали цитратную кровь (лимоннокис­лый натрий добавляли в кровь для предупреждения ее свертывания). Прополис расплавляли на кипящей водяной бане. После отстаивания получалась прозрачная, янтарного цвета сиропообразная жидкость, которая и была использована при проведении опытов. Каплю такой жидкости добавляли к питательной среде, в которой находились предметные стекла с туберкулезными бактериями из мокроты. Роста туберкулезных палочек ни в одном случае не наблюдалось. Во всех контрольных средах, куда прополис не добавляли, выявлен обильный рост туберкулезных колоний.

Биологически безвредный для организма (Т.В.Вино­градова, Г.П.Зайцева, 1966) прополис обезвреживающе действует на токсины. Так, З.Х.Каримова, М.Г.Берим, К.Б.Брудная, М.З.Туктарова, А.Х.Загидуллин (1964) установили, что экзотоксин дифтерийных коринобактерий после обработки экстрактом прополиса не вызывает у морских свинок местных изменений (некроза) и общей интоксикации организма, в то время как контрольные животные, получившие то же количество токсина без предварительной обработки препаратом прополиса, погибают от дифтерийной интоксикации, внутрикожное введение вызывает у них инфильтрат с последующим некрозом. Эти данные свидетельствуют о том, что применение препаратов прополиса может быть целесообразным при лечении инфекционных заболеваний, сопровождающихся интоксикацией организма (туберкулез, дифтерия, скарлатина и др.).

Представляет интерес изучение антимикробной активности антибиотиков в присутствии фенольно гидрофобного препарата прополиса и влияния его на появление антибиотикоустойчивых форм бактерий. Резистентные формы микроорганизмов, развивающиеся в результате применения антибиотиков с широким спектром действия, вызывают иногда осложнения с длительным, тяжелым, часто рецидивирующим течением. В.Ф.Оркин (1971) и В.И.Горшунова (1971) обнаружили, что препарат прополиса  оказывает поливалентное действие и не вызывает образования устойчивых форм микроорганизмов. На основании этих данных В.П.Кивалкина, В.И.Горшу­нова (1973) исследовали характер активности суммарного препарата (комплекса антибиотик-прополис). Антимикробную активность антибиотиков (пенициллин, стрептомицин, тетрациклин, неомицин, левомицетин, полимиксин и олеандомицин) в сочетании с препаратом прополиса определяли методом серийных разведений в мясо-пептонном агаре, содержащем прополис в суббактериостатических концентрациях. Предварительно определяли бактериостатические концентрации антибиотиков и прополиса в отношении микроорганизмов Staph.аureus и E.coli. Было установлено, что фенольно гидрофобный препарат прополиса усиливает в плотной питательной среде бактериостатическую активность тетрациклина, неомицина и полимиксина в 10-100 раз в отношении золотистого стафилококка и во столько же раз увеличивает активность стрептомицина, пенициллина, неомицина, полимиксина и тетрациклина к кишечной палочке. Адаптация бактерий к неомицину, левомицетину происходит одинаково как на прополисированных, так и на обычных средах без прополиса. Устойчивость культур к стрептомицину, тетрациклину, неомицину и полимиксину увеличивается сравнительно быстрее в присутствии препарата прополиса. Отмечено, что препарат прополиса усиливает антимикробную активность мазей с ан­тибиотиками. Бактерицидное действие прополисо-антибио­тиковых мазей проявляется в отношении золотистого стафилококка через 15 мин, кишечной палочки через 20-30 мин, а таких же мазей, но без прополиса, только через 2-12 ч. Противомикробная активность прополисо-антибиотиковых мазей сохраняется 9-12 месяцев, мазей с теми же антибиотиками без прополиса – до 2-3 месяцев.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что фенольно-гидрофобный препарат прополиса  усиливает и пролонгирует антимикробную активность антибиотиков в питательных средах и мазях, но не ингибирует появление антибиотикоустойчивых форм in vitro.

В экспериментах на животных В.П.Кивалкина, Э.Л.Бударкова (1972) изучали влияние прополиса на иммуногенез при иммунизации столбнячным антитоксином и установили, что препараты прополиса стимулирует неспецифические и специфические факторы иммунитета.

Действие на микрофлору желудочно-кишечного тракта водно-спиртовой эмульсии прополиса при пероральном введении исследовал С.Э.Палмбаха (1972) в опытах на кроликах и поросятах. Результаты бактериологического исследования кала кроликов показали, что среди различных групп микроорганизмов, растущих на мясо-пептонном агаре в аэробных условиях, на протяжении всего наблюдения суммарное число кишечных палочек, ацидофильных бактерий и энтерококков было значительно выше. В течение опы­та содержание этих бактерий увеличивалось или уменьшалось: уменьшение было более выраженным. Clostridium perfringens удалось выделить только из отдельных проб кала в виде единичных колоний.

Содержание микрофлоры у отдельных индивидуумов внутри одной и той же группы, находившихся в одинаковых условиях, существенно отличалось, однако данные были статистически недостоверными. Это позволило автору сделать вывод, что длительное пероральное применение водно-спиртовой эмульсии прополиса не приводит к дисбактериозу, что имеет важное практической значение.

Было также доказано, что фенольно гидрофобный препарат прополиса обладает антигриппозным свойством (Н.П.Иойриш, 1966). Результаты экспериментов дают основание рекомендовать спиртовый экстракт прополиса для клинико-экспериментальной апробации его лечебно-профилактических свойств при вирусном гриппе, возможно и при других вирусных инфекциях.

В чем же заключается механизм антимикробного эффекта прополиса? К.А.Кузьмина (1971) констатирует, что в значительной степени это свойство пчелиного клея основано на его тонизирующем и укрепляющем действии. Под влиянием препарата прополиса усиливается фагоцитоз, увеличивается в крови содержание защитного белка пропердина, интенсивнее идет выработка специфических антител против разнообразных микроорганизмов и их токсинов. Эта гипотеза не дает всестороннего ответа на рассматриваемый вопрос, необходимы дальнейшие глубокие исследования.

Данные ученых о бактерицидном и бактериостатическом действии прополиса нашли подтверждение в работах зарубежных исследователей – Гамблетона, Верже, Гублера, Маурицио, Бранджи, Павана, П.Лави, Марин, Матеску, Балачи, Попа и др. (цит. по Т.В.Вино­градовой, Г.П.Зайцева, 1966). Особое значение представляют труды французского ученого П.Лави, который проведя сравнительное опре­деление свойств спиртовых извлечений пчелы, прополиса и пыльцы, ацетоновых – меда, воска и эфирного – маточного молочка – установил, что экстракты, полученные из прополиса, обладают наибольшей антимикробной активностью.

Как видно, установлено действие препарата прополиса на целый ряд бактерий и грибов, однако различные способы приготовления препаратов и многочисленные методы определения их антимикробной активности часто не дают возможности сравнивать результаты исследований.

Нами (совместно с Т.А.Шуб, К.А.Каграмановой, Г.Я.Кивман) проведено сравнительное изучение антимикробной активности спиртовых вытяжек образцов прополиса различного географического происхождения на основе единого метода.

Немедленное выпадение восков, смол и других веществ прополиса в осадок при разбавлении водой спиртовых растворов показало невозможным определение его антимикробного действия известными методами серийных разведений в жидкой питательной среде.

Используя общепринятые принципы, мы применили метод серийных разведений спиртовых вытяжек прополиса в 1,5% агаре Хоттингера и агаре Сабуро в чашках Петри, предварительно убедившись в том, что внесение в агар 10% спиртовых растворов лишь замедляет, но не ингибирует рост взятых в опыт тест-культур микроорганизмов.

Из исходных 1% спиртовых экстрактов прополиса, полученных с помощью 95% спирта этилового, производили ряд последовательных двукратных разведений, каждое из которых по 1 мл помещали в чашку Петри диаметром 100 мм. Сюда же вносили 9 мл расплавленного агара и тщательно перемешивали (агар не охлаждали, учитывая термостабильность спиртовых растворов прополиса).

В контрольные чашки вносили по 1 мл спирта этилового и 9 мл агара. После застывания агара чашки подсушивали в термостате и на отдельные секторы петлей наносили 18-29 часовые бульонные культуры тест-микро­организмов: Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Escheri­chia coli, Pseudomonas aeruginosa.

Чашки инкубировали при 37°С 48 часов. Кроме того, использовали культуру гриба Candida albicans, которую выращивали в течение 3 суток на жидкой среде Сабуро, затем переносили на агаризованную среду Сабуро и выдерживали при комнатной температуре в течение 3 сут.

Все образцы препаратов прополиса оказывают антимикробное действие как на грамположительные палочки (Bacillus cereus), так и на грамположительные кокки (Staphylo­coccus aureus) (табл. 3). В условиях опыта обнаружено слабое действие на грамотрицательные бактерии (Esche­richia coli и Pseudomonas aeruginosa), а также на культуру гриба (Candida albicans).

Бактериостатическая концентрация прополиса в отно­шении Bacillus cereus колеблется в пределах 125-250 мкг/мл, а Staphylococcus aureus – 125-500 мкг/мл. Для Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans концентрация прополиса (1000 мкг/мл), как правило, практически не оказывала антимикробного действия.

Наиболее активными из исследованных образцов прополиса оказались образцы, собранные в Одесской, Днепропетровской, Черкасской, Хмельницкой областях, а также в Болгарии, Франции, Узбекистане, Краснодарском и Красноярском краях, бактериостатическое действие которых в отношении Bacillus cereus проявлялось уже при концентрации 60 мкг/мл, а концентрация 250 мкг/мл задерживает рост гриба Candida albicans, нечувствительного к большинству взятых в опыт образцов прополиса. Наименьшую активность наблюдали у прополиса Московской и Крымской областей.

Таблица 3
Антимикробная активность 1% спиртовых растворов
различных образцов прополиса (мкг/мл)
  Культура микроорганизмов
Область сбора
прополиса
Bacillus cereus
8035
Staphy­lococcus
aureus
209P
Escheri­chia coli M-17 Pseudo­monas aerugi­nosa 47 Candi­da albi­cans
1 2 3 4 5 6
Алжир 125 250 >1000 >1000 1000
Бангладеш 125 500 >1000 >1000 1000
Белгородская обл. 250 250 >1000 >1000 500
Белоруссия 250 500 >1000 >1000 1000
Болгария 60 250 >1000 >1000 500
Винницкая обл. 250 500 >1000 >1000 >1000
Волгоградская обл. 125 125 >1000 >1000 1000
Германия 125 250 >1000 >1000 500
Днепропетровская обл. 60 250 >1000 >1000 500
Донецкая обл. 250 500 >1000 >1000 >1000
Житомирская обл. 125 250 >1000 >1000 500
Запорожская обл. 250 500 >1000 >1000 1000
Ивановская обл. 125 250 >1000 >1000 1000
Киевская обл. 250 500 >1000 >1000 1000
Киргизия 250 500 >1000 >1000 500
Кировоградская обл. 125 250 >1000 >1000 500
Краснодарский край 60 125 >1000 >1000 500
Красноярский край 250 250 >1000 >1000 1000
Крым 250 1000 >1000 >1000 >1000
Курская обл. 125 250 >1000 >1000 >1000
Латвия 250 500 >1000 >1000 >1000
Липецкая обл. 125 500 >1000 >1000 1000

Продолжение таблицы 2

1 2 3 4 5 6
Литва 250 250 >1000 >1000 500
Московская обл. 250 1000 >1000 >1000 1000
Одесская обл. 250 1000 >1000 >1000 250
Полтавская обл. 125 125 >1000 >1000 1000
Ростовская обл. 125 125 >1000 >1000 500
Тамбовская обл. 125 250 >1000 >1000 >1000
Узбекистан 60 125 >1000 >1000 250
Франция (1974 г.) 60 250 >1000 >1000 500
Франция (1975 г.) 125 250 >1000 >1000 1000
Хабаровский край 60 250 >1000 >1000 500
Харьковская обл. 250 500 >1000 >1000 >1000
Херсонская обл. 250 500 >1000 >1000 >1000
Хмельницкая обл. 60 250 >1000 >1000 500
Черкасская обл 60 125 >1000 >1000 1000
Черниговская обл. 125 250 >1000 >1000 500
Черновицкая обл. 250 500 >1000 >1000 1000
Эстония 250 250 >1000 >1000 500
Ярославская обл. 125 500 >1000 >1000 >1000

 

 

Установленная в наших опытах антимикробная активность препаратов прополиса согласуется с литературными данными (П.Лови, 1981) о слабом его действии в отношении Escheri­chia coli и отсутствии действия прополисных экстрактов в отношении Pseudomonas pyocyanae.

Другие авторы (Ф.Т.Порхун, Л.Я.Боровая, 1970) также сообщают о высокой концентрации спиртового экстракта прополиса, которая является бактерицидной в отношении грамотрицательных микроорганизмов. Так, для кишечной и синегнойной палочек доза составляет 7000 мкг/мл, для палочки, вызывающей дизентерию – 3500 мкг/мл. Однако, отдельные исследователи (П.Лови, 1981) отмечают заметную чувствительность синегнойной палочки к препарату прополиса, которую мы не наблюдали. Отмечена гибель Pseudomonas pyocyanea после 3-х часового контакта с прополисом. Подобные расхождения мы объясняем различными методами, использованными авто­рами для указанных исследований, которые, к сожалению, не описаны в литературе, что не дает возможности их вос­произвести и обсудить.

Наши данные о чувствительности золотистого стафилококка к препарату прополиса согласуются с работами, ранее проведенными в нашей стране (С.Е.Палмбаха, С.А.По­правко, 1975). Особо следует отметить исследования, иллюстрирующие чувствительность гриба Candida albicans к фенольно гидрофобному препарату прополиса, однако автор, пользуясь методом дисков, применял очень высокую концентрацию препарата прополиса – 30% спиртовый раствор, в то время как мы считаем нецелесообразным использовать для определения антимикробной активности in vitro концентрации, превышающую 1000 мкг/мл.

Сравнение антимикробного действия образцов прополиса (табл. 3) показывает, что они практически не отличаются друг от друга. Имеющиеся некоторые отклонения (Одесская, Московская области, Крым) вряд ли можно отнести за счет района сбора сырья. Вероятнее всего, взятые для исследования образцы относятся к нестандартным, так как содержат большое количество восковых, смолобальзамических веществ и механических примесей.

Близкую антимикробную активность остальных исследуемых образцов прополиса можно объяснить только однородностью химического состава.

Один из образцов прополиса (Харьковская область) мы подвергли анализу для определения чувствительности к нему патогенных штаммов Staphylococcus aureus. Культуры были выделены от больных во Всесоюзном НИИ акушерства и гинекологии МЗ России. Все 7 штаммов имели желто-оранжевый пигмент, образовывали зоны гемолиза на кровяном агаре, ферментировали маннит в анаэробных условиях и давали положительную реакцию плазмокоагуляции. Параллельно испытывали действие препарата прополиса на музейный штамм золотистого стафилококка 209Р.

Все исследованные штаммы патогенного стафилококка оказались более чувствительными к препарату прополиса, чем музейный штамм 209 Р (табл. 4). Уточнение этого факта имеет принципиальное научно-практическое значение, так как растворы различных образцов прополиса, и другие лекарственные формы, благодаря этим качествам, могут успешно применяться в клинике для лечения гнойных дерматитов и других заболеваний, вызванных стафилококками.

Таблица 4
Антимикробная активность 1% спиртового раствора прополиса (мкг/мл) в отношении различных патогенных и музейного штаммов стафилококка
Штаммы стафило­кокка 871/72 673/74 651/52 531/32 539/40 685/86 2807/с 209 Р
Актив­ность 327 316 234 293 253 257 265 487

Несомненный интерес представляет также уточнение нашего наблюдения по более высокой чувствительности к фенольно гидрофобному препарату прополиса золотистого стафилококка по сравнению с остальными исследованными культурами патогенных микроорганизмов (Pseudomonas aeruginosa и др.).

Антимикробная активность препарата прополиса по абсолютной величине значительно уступает активности антибиотиков, в меньшей степени – других антибактериальных средств: наиболее активные образцы прополиса по действию на патогенные стафилококки приближаются к сульфаниламидам.

В настоящее время широкое распространение штаммов стафилококков, устойчивых к действию химиотерапевтических препаратов, в первую очередь антибиотиков, крайне обострила проблему стафилококковой инфекции и стафилококкового носительства. В связи с этим, необходимо обратить внимание на то обстоятельство, что до сего времени не выделены штаммы стафилококков с естественной устойчивостью к фенольно гидрофобному препарату прополиса. Попытки искусственного получения резистентных штаммов путем многократных пересевов на прополисированных средах также не дали результатов. Очевидно, наличие в составе препарата прополиса более 30 веществ, обладающих выраженной в той или иной степени антибактериальной активностью и различным механизмом действия, делают вообще маловероятной возможность существования резистентных штаммов из числа чувствительных к нему видов микроорганизмов.

Существенным преимуществом фенольно гидрофобного препарата прополиса является и то, что он обладает противовоспалительным, регенерирующим и анестезирующим свойствами, несомненно, важными для терапии и практически отсутствующими у подавляющего большинства химиотерапевтических препаратов.

Таким образом, даже этот неполный перечень многочисленных исследований по установлению спектра антимикробной активности фенольно гидрофобного препарата  прополиса указывает на целесообразность его применения в медицине.